萌新求问，Rt-PCR，qPCR，PCR的区别与不同是什么？ - 知乎
qPCR就是quantity PCR，定量PCR，也是荧光定量PCR，检测基因转录水平的表达量。 PCR就是一种技术，通过高温变性、低温复性，适温延伸的循环来扩增基因片段。 PCR根据不同的实验目的可以分 …
能讲解一下ChIP qPCR实验的详细步骤吗? - 知乎
ChIP的标志之一是通过qPCR定量纯化的DNA产物的能力。 需要以解交联和纯化后2%的Input DNA（不稀释）、目的蛋白抗体IP后的DNA、IgG抗体IP后的DNA分别作为模板（各取未稀释的DNA 2ul）， …
做qpcr实验时反转的dna不用时应该冷冻保存还是低温保存？
Dec 17, 2024 · 做qpcr实验时反转的dna不用时应该冷冻保存还是低温保存？ 就比如我连续三天都用这一个dna样本测，我难道每天都要晚上冷冻然后第二天解冻吗？ 显示全部 关注者 5
请问Qpcr用双内参怎么计算数据呀？ - 知乎
May 26, 2022 · 重复性： qPCR 实验应该具有良好的重复性，即相同条件下重复实验得到的结果应该相似。 溶解曲线： 单峰无杂峰，TM在75-90之间。 如果 qPCR 数据满足以上要求，则可以认为数据可用。
qPCR引物设计需要跨外显子连接点的具体含义是啥？ - 知乎
Apr 27, 2022 · 不用太纠结，你只要理解为之所以要跨外显子是因为避免 cDNA 或者RNA模板中有残留的 基因组DNA 导致的假阳性结果，跨外显子意味着如果用基因组DNA作为模板，该序列将包含至少一 …
如何针对一个基因的不同剪切设计特异性qPCR引物？ - 知乎
前向引物：位于外显子3的特异性区域。 反向引物：跨越外显子3和4的剪接点。 引物序列 前向引物：5’-AGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 反向引物：5’-TGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 通过以上步骤和 …
qPCR曲线异常什么原因？扩增曲线平台期下降？ - 知乎
在RT-qPCR的实验过程中，大家或多或少都会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常、重复性差等问题。 给大家整理了SYBR Green染料法的常见问题及解决方案，以供大家参考。 Part 1 扩增曲线异常 正常 …
荧光定量PCR是用来干什么的？ - 知乎
1.qPCR试剂盒 按照MIQE要求，我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件，包括PCR的反应体系配置，用的什么试剂盒，制造商是谁，多大的反应体系，用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描 …
实时荧光定量PCR（RT-qPCR）
RT-qPCR原理的三个主要步骤： 1 反转录： 使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。 该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。 反转录过程中使用特定引物。 2 PCR扩增： 使用 …
qpcr 的原理是什么？ - 知乎
qPCR，也称实时定量PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或荧光基团，通过收集荧光信号实时监测扩增产物的量的变化，最后通过标准曲线和Ct值对待测样品进行定量分析。